化學(xué)發(fā)光分析儀是利用化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的光輻射進(jìn)行分析的儀器。它的工作原理基于化學(xué)發(fā)光現(xiàn)象,即在某些化學(xué)反應(yīng)中,反應(yīng)物或產(chǎn)物在從激發(fā)態(tài)返回到基態(tài)時(shí)會(huì)發(fā)射出光子,從而產(chǎn)生光輻射。這種光輻射的強(qiáng)度與反應(yīng)物的濃度成正比,通過(guò)測(cè)量光輻射的強(qiáng)度,可以對(duì)反應(yīng)物進(jìn)行定量分析。
化學(xué)發(fā)光是指在某些化學(xué)反應(yīng)中,反應(yīng)物或產(chǎn)物在從激發(fā)態(tài)返回到基態(tài)時(shí)發(fā)射出光子的現(xiàn)象。這種現(xiàn)象的產(chǎn)生需要滿足兩個(gè)條件:一是反應(yīng)物或產(chǎn)物必須處于激發(fā)態(tài);二是激發(fā)態(tài)的物質(zhì)在返回基態(tài)時(shí)能夠發(fā)射光子。根據(jù)化學(xué)發(fā)光的來(lái)源,可以分為直接化學(xué)發(fā)光和間接化學(xué)發(fā)光兩種類型。
-直接化學(xué)發(fā)光:在這種類型的化學(xué)發(fā)光中,反應(yīng)物或產(chǎn)物本身具有發(fā)光特性,如魯米諾(luminol)與過(guò)氧化氫(H2O2)的反應(yīng)。魯米諾在堿性條件下與H2O2反應(yīng)生成激發(fā)態(tài)的3-氨基鄰苯二甲酸根離子,當(dāng)這個(gè)激發(fā)態(tài)離子返回基態(tài)時(shí)發(fā)射出藍(lán)光。
-間接化學(xué)發(fā)光:在這種類型的化學(xué)發(fā)光中,反應(yīng)物或產(chǎn)物本身不具有發(fā)光特性,但它們可以通過(guò)能量轉(zhuǎn)移的方式將能量傳遞給具有發(fā)光特性的受體分子,使受體分子發(fā)射光子。例如,某些生物體內(nèi)的酶促反應(yīng)會(huì)產(chǎn)生激發(fā)態(tài)的中間產(chǎn)物,這些中間產(chǎn)物可以通過(guò)能量轉(zhuǎn)移的方式將能量傳遞給熒光素,使其發(fā)射光子。
化學(xué)發(fā)光分析儀主要由以下幾個(gè)部分組成:
-光源:用于提供穩(wěn)定的激發(fā)光,通常采用LED或激光器作為光源。
-樣品池:用于放置待測(cè)樣品和試劑的容器,通常采用石英或玻璃材料制成。
-光電探測(cè)器:用于檢測(cè)化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的光輻射,常見(jiàn)的光電探測(cè)器有光電二極管(PD)、光電倍增管(PMT)和電荷耦合器件(CCD)等。
-信號(hào)處理系統(tǒng):用于將光電探測(cè)器檢測(cè)到的光信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào),并進(jìn)行放大、濾波、模數(shù)轉(zhuǎn)換等處理,得到與反應(yīng)物濃度成正比的信號(hào)。
-控制系統(tǒng):用于控制整個(gè)分析過(guò)程,包括樣品的加入、反應(yīng)條件的控制、信號(hào)采集和數(shù)據(jù)處理等。